层析柱的操作方法
以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例：
1.吸附剂的处理及柱子装填
将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中，于105。c活化2h后，取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充，填满整个柱体，不留死体积，密封后用柱塞式计量溶剂泵按一(5：95)比例泵入溶剂，至溶剂流出止。
2.上样
将冬凌草的---提取物400g用适量溶解，泵入中压柱柱头，然后泵入1000rid。
3.洗脱
以一定比例的一为洗脱液，60ml/min的流速进行梯度洗脱，柱的使用压力为2～ 3kg/c 。按每份500ml收集，tlc检识展开剂一(2：8)，显色剂5%香草醛---液
至洗脱完全，相同流份合并，回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加入适量热溶后自然放置，析出结晶，为冬凌草甲素。
4.层析柱再生、平衡
有效成分经tlc检识全部流出后，用纯5000ml再生，一(5：95)平衡后，可再次上样，反复使用(使用次数随原料不同而异，大孔树脂柱，一般可连续使用2—6个月以上)。
5.重结晶
冬凌草甲素结晶析出完全后，减压过滤，然后用少量洗涤(洗涤液保留，作下次热溶冬凌草甲素用)。将冬凌草甲素再用适量热溶后放置，结晶再次析出，待结晶完全后，大孔树脂柱生产厂家，抽滤，用少量洗涤，将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中，35度真空干燥至恒重。密封于瓶中，置干燥器中保存。
6.薄层层析分析
取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品溶解后点于同一硅胶g薄层板上，以一(8：2)为展开剂进行展开，5% 香草醛---液显色，于105。c烘至斑点清晰。表明在该展开系统下，冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的rf值，并呈现出同样的蓝绿点，在制备的冬凌草甲素样品中，没有杂质斑痕。
树脂未使用状态下的储存
树脂的内、外包装可有效保护树脂免受污染、损失与水分流失，如果树脂包装破损或敞开，一方面可能导致树脂外漏受污，且散落的树脂颗粒会导致地面易滑，带来树脂损失的同时，也会给现场人员的安全带来---（存在滑倒跌落风险）；另一方面，树脂长期暴露于空气中，不但存在树脂发生物理、化学、生物污染而变质的可能，也会导致树脂表面与内部水汽蒸发，引起树脂失水，影响树脂性能的风险。因此，无论何种树脂，一旦打开包装，应尽快投入使用；未使用的树脂应重新封装保存（可使用原有包装，但须注意包装完好与洁净）。树脂储存过程中一旦发现包装破损，应及时进行包装修补或倒换包装。
需要---注意的是，一旦发现树脂因失水而变得干燥，切不可直接用水进行润湿，大孔树脂柱供应，以免树脂快速溶胀而导致骨架断裂，大孔树脂柱生产商，产生树脂破碎。而是应该向树脂中慢慢加入浓盐水，静置1小时以上，以使树脂内、外溶液体系达到平衡，再通过连续处理的方式逐步降低盐水浓度，实现盐水的置换，后再用纯水清洗干净。对于干燥程度较高的树脂，建议可在实验室---行包括盐水浓度、加入速度、平衡时间等工艺参数的优化论证，确定工艺后再进行规模化处理。
层析柱如何来选择层析柱的关键要考虑以下几点：两端的4f塞是否密封---，中间的玻璃管的透明度以及耐压度。是否有相应的转换接头来控制进料高度。层析柱的介绍层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，从而分离的一种层析法。工业化玻璃层析柱层析柱主要是根据要分离的植物有效成份、化工中间体、化合物等物质与玻璃层析柱内的不同填料：一、在不同的亲和度，二、在不同浓度的酸碱液下，三、在不同的极性溶液下，四、一定压力下在填料上不同的流速下有层次的分层
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