层析柱的操作方法1.层析柱再生、平衡有效成分经tlc检识全部流出后，用纯5000ml再生，一(5：95)平衡后，可再次上样，反复使用(使用次数随原料不同而异，一般可连续使用2—6个月以上)。2.重结晶冬凌草甲素结晶析出完全后，减压过滤，然后用少量洗涤(洗涤液保留，作下次热溶冬凌草甲素用)。将冬凌草甲素再用适量热溶后放置，大孔树脂柱价格，结晶再次析出，待结晶完全后，大孔树脂柱，抽滤，用少量洗涤，将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中，35度真空干燥至恒重。密封于瓶中，置干燥器中保存。3.薄层层析分析取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品溶解后点于同一硅胶g薄层板上，以一(8：2)为展开剂进行展开，5% 香草醛---液显色，于105。c烘至斑点清晰。表明在该展开系统下，冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的rf值，并呈现出同样的蓝绿点，在制备的冬凌草甲素样品中，没有杂质斑痕。
一文了解亲和层析柱装柱注意事项
亲和层析 一般用于纯化蛋白质和---等大分子物质的方法的主要依据是各种大分子物质之间理化特性的差---。下面我们来分析一下亲和层析过程中的注意事项。
1.上样
亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短，通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件，包括上样流速、缓冲液种类、ph、离子强度、温度等，以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。
一般生物大分子和配体之间达到平衡的速度很慢，所以样品液的浓度不易过高，上样时流速应比较慢，以---样品和亲和吸附剂有充分的接触时间进行吸附。
---是当配体和待分离的生物大分子的亲和力比较小或样品浓度较高、杂质较多时，可以在上样后停止流动，让样品在层析柱中反应一段时间，或者将上样后流出液进行二次上样，以增加吸附量。样品缓冲液的选择也是要使待分离的生物大分子与配体有较强的亲和力。另外样品缓冲液中一般有一定的的离子强度，以减小基质、配体与样品其它组分之间的非特---吸附。
生物分子间的亲和力是受温度影响的，大孔树脂柱多少钱，通常亲和力随温度的升高而下降。所以在上样时可以选择适当较低的温度，使待分离的物质与配体有较大的亲和力，能够充分的结合；而在后面的洗脱过程可以选择适当较高的温度，大孔树脂柱厂家，使待分离的物质与配体的亲和力下降，以便于将待分离的物质从配体上洗脱下来。
上样后用平衡洗脱液洗去未吸附在亲和吸附剂上的杂质。平衡缓冲液的流速可以快一些，但如果待分离物质与配体结合较弱，平衡缓冲液的流速还是较慢为宜。如果存在较强的非特---吸附，可以用适当较高离子强度的平衡缓冲液进行洗涤，但应注意平衡缓冲液不应对待分离物质与配体的结合有明显影响，以免将待分离物质同时洗下。
层析柱与液相柱的区别
1、压力
液相色谱柱（尤其是分析性液相色谱）：压力较高，一般为10-20mpa
层析柱：一般为常压，或使用真空泵（0.1mpa左右）
2、填料
液相色谱柱：粒径较小（常规5-20um)
层析柱:粒径较大
3、分离度
由第二项决定，粒径越小，单位长度下理论塔板数越高
液相色谱柱：分离度比层析柱好
4、效率
液相色谱柱：分离速度快，一般在一小时内
层析柱:分离时间长，一小时以上
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