




层析柱装柱步骤流程
1.hetp计算
所用样品为1.0%nacl或纯溶液,上样大约为总柱床体积的1%。对于34和50μm的填料,使用的线性流速应为30 cm/h,层析柱供应,90μm的填料选择20 cm/h的线性流速。通过下式计算hetp:
hetp = l/n
其中l为柱床高度(cm),n为理论塔板数,层析柱,n=5.54 (ve/wh)2;
ve为洗脱体积(ml),wh峰高一半处的峰宽(ml)。
2.峰对称因子计算
洗脱峰的峰形应尽可能对称,层析柱多少钱,即对称因子尽可能接近1。as按下列公式计算:
as = b/a
其中,a为峰高10%处的前半个峰宽,b为峰高10%处后半个峰宽。
大孔吸附树脂的分类
根据树脂极性的不同,大孔吸附树脂可以分为非极性、中极性、极性和强极性四类.
非极性吸附树脂是由偶极距很小的单体聚合而成,不含任何功能基团,表面的疏水性较强,可通过与有机物的疏水部分作用而吸附溶液中的有机物,适合于从极性溶剂(如水)中吸附非极性物质。
中极性吸附树脂含有酯基,层析柱价格,其表面兼有疏水和亲水部分,既可从极性溶剂中吸附非极性物质,也可从非极性溶剂中吸附极性物质。
极性和强极性吸附树脂一般通过静电作用吸附极性物质。
硅胶柱层析和大孔树脂柱层析的区别?
大孔吸附树脂是一类不含交换基团且有大孔结构的高分子吸附树脂,具有---的大孔网状结构和较大的比表面积,可以通过物理吸附从水溶液中有选择地吸附有机物即非极性或极性较弱的物质,具有物理化学稳定性高、比表面积大、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、使用周期长、宜于构成闭路循环、节省费用等诸多优点.树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附质) 之间的范德华引力,通过它---的比表面进行物理吸附而工作,使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的.
硅胶柱的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离,一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程.其中有微孔,对不同化合物的吸附能力不同,然后选用适当的洗脱剂进行洗脱从而达到分离.
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