




---的不锈钢层析柱使用技巧常用吸附剂的种类:氧化铝、硅胶、聚---、---、滑石粉、氧化钙(镁)、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。几种常见吸附剂的特性(1)氧化铝:市售层析用氧化铝有碱性、酸性2类,粒度规格大多为100-150目。碱性氧化铝(ph9—10):适用于碱性物质(如胺、)和对酸敏感的样品(如缩醛、糖苷等),也适用于烃类、甾体化合物等中性物质的分离。但这种吸附剂能引起被吸附的醛、酮的缩合。酯和内酯的水解、醇---的脱水、---糖的去---化、---a和k等的破坏等---副反应。所以,这些化合物不宜用碱性氧化铝分离。酸性氧化铝(ph3.5—4.5):适用于酸性物质如有机酸、---酸等以及色素和醛类化合物的分离。中性氧化铝(ph7—7.5):适用于醛、酮、醌、苷和---化合物以及在碱性介质中不稳定的物质如酯、内酯等的分离,也可以用来分离弱的有机酸和碱等。
蛋白层析柱操作流程
操作流程一般为:预处理、逆流洗柱、水洗、吸附、解吸和再生
1.预处理:在吸附树脂的生产过程中,一般采用的是工业级原料,产品没有经过进一步纯化处理,树脂内部残留少量单体,树脂柱生产厂家,所以在使用之前,需用水溶性溶剂对其浸泡处理,树脂柱,然后用去离子水通过树脂层,树脂柱厂家,置换出水溶性溶剂离子方可投入使用。
2.逆流洗柱:用水洗出去水离子及破碎填料,树脂装入后,用蒸馏水反洗树脂层,直至出水清晰、无气味、无细碎树脂为止。再依次用酸碱等浸泡、冲洗树脂层,至出水呈中性为止。
3.水洗:水洗的主要目的是除去所附着的渣滓。
大型层析柱的特点及简介
大型层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,树脂柱生产商,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关。大型层析柱
以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例
吸附剂的处理及柱子装填
将一定量薄层层析硅胶装人搪瓷盘置于烘箱中,取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按一比例泵人溶剂,至溶剂流出止。
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