一文了解亲和层析柱装柱注意事项
（1）非特---洗脱
非特---洗脱是指通过改变洗脱缓冲液ph、离子强度、温度等条件，降低待分离物质与配体的亲和力而将待分离物质洗脱下来。
当待分离物质与配体亲和力较小时，一般通过连续大体积平衡缓冲液冲洗，就可以在杂质之后将待分离物质洗脱下来，这种洗脱方式简单、条件温和，不会影响待分离物质的活性。但洗脱体积一般比较大，得到的待分离物质浓度较低。
当待分离物质和配体结合较强时，可以通过选择适当的ph、离子强度等条件降低待分离物质与配体的亲和力，树脂柱供应，具体的条件需要在实验中摸索。可以选择梯度洗脱方式，这样可能将亲和力不同的物质分开。如果希望得到较高浓度的待分离物质，可以选择酸性或碱性洗脱液，或较高的离子强度一次快速洗脱，这样在较小的洗脱体积内就能将待分离物质洗脱出来。
但选择洗脱液的ph、离子强度时应注意尽量不影响待分离物质的活性，而且洗脱后应注意中和酸碱，透析去除离子，以免待分离物质丧失活性。对于待分离物质与配体结合非常牢固时，可以使用较强的酸、碱或在洗脱液中加入脲、胍等变性剂使蛋白质等待分离物---性，而从配体上解离出来。然后再通过适当的方法使待分离物质恢---性。
层析柱进气泡怎么办？
空气进入，如缓冲液走空，连接进入系统过程中
用纯水反向冲洗，树脂柱，如果有柱位阀可直接切换流向，没有的话可将柱子反接
对于大多数层析柱来说可用---冲洗，以提高排气效率
缓冲液中有气泡
上柱前将缓冲液脱气
在缓冲液入口使用空气感应器
温度影响，如在冷室操作后马上在室温操作，或低温缓冲液直接在室温使用
缓冲液在使用前达到热平衡
层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，树脂柱价格，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外，直径加大，树脂柱生产厂家，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。分族分离时用短柱，一般凝胶柱长20-30厘米，柱高与直径的比较5:1─10:1，凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。 分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1，常用凝胶柱有50×25厘米，10×25厘米。滤板下的死体积应尽可能的小，如果支掌滤板下的死体积大，被分离组分之间重新混合的可能性就大，其结果是影响洗脱峰形，出现拖尾出象，降低分辩力。在分离时，死体积不能超过总床体积的1/1000。
树脂柱-天津龙鼎世纪轻工设备-树脂柱供应由天津龙鼎世纪轻工设备有限公司提供。天津龙鼎世纪轻工设备有限公司为客户提供“机械,化工生产设备”等业务，公司拥有“龙鼎”等品牌，---于行业设备等行业。，在天津市静海开发区津德路东侧的名声---。欢迎来电垂询，联系人：王经理。
联系我们时请一定说明是在100招商网上看到的此信息，谢谢！
本文链接：https://tztz238917a1.zhaoshang100.com/zhaoshang/278153188.html
关键词：
滇公网安备 53011202000392号