




柱头安装是否合适及是否严密的检查
1、检查下柱头是否按图纸要求安装?(要求按图纸要求安装)
2、检查下柱头内,是否安装了防止吸附剂(例如硅胶)漏出的滤布(或滤网)。
3、所用滤布(滤网)的材质要求---所用溶剂的腐蚀,而且孔径很小,一般要求使用500目以上孔径大小的滤布(网)。
4、下柱头安好,层析柱供应,紧固后,从柱上端(开口)加入所用洗脱剂中极性较小的一种溶剂(例如已烷、、等),使溶剂液面比下柱头上部分离出20-30厘米,仔细观察下柱头是否漏溶剂。如果漏,则必须坚固(或重装),直至不漏为止。
5、检查确实不漏后,放出柱内溶剂,准备装吸附剂(例如硅胶等)。
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,四平层析柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外,直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞,一般不超过1米。分族分离时用短柱,一般凝胶柱长20-30厘米,柱高与直径的比较5:1─10:1,凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。 分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1,常用凝胶柱有50×25厘米,10×25厘米。滤板下的死体积应尽可能的小,如果支掌滤板下的死体积大,被分离组分之间重新混合的可能性就大,其结果是影响洗脱峰形,出现拖尾出象,降低分辩力。在分离时,死体积不能超过总床体积的1/1000。
层析柱上柱子后压力大怎么办
19是什么单位?mpa?
先试试空白运行,就是不经过柱子光走系统,看看压力是多少,层析柱多少钱,检查是否系统压力过大。
如果系统压力正常,则检查溶液是否澄清,有无沉淀或泛白。
如果溶液没有问题,检查柱头是否堵塞,柱头前的滤膜是否需要清洗。
然后检查下填料是否完整,层析柱厂家,有无被压碎的填料或者有无杂志吸附在填料上,参照说明书清洗再生下填料。
层析柱压力过大容易压碎填料,需要及时暂停减小压力后继续上柱。
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